近期,中國科學(xué)院蘇州生物醫(yī)學(xué)工程技術(shù)研究所繆鵬課題組開發(fā)了一種基于環(huán)張力促進的疊氮-炔環(huán)加成反應(yīng)(SPAAC)輔助三維DNA納米結(jié)構(gòu)的新型miRNA檢測方法。該成果發(fā)表在《納米快報》(Nano Letters)上。
研究團隊設(shè)計了一種由五條單鏈DNA組成的DNA截錐體納米結(jié)構(gòu),通過巰基修飾將其固定在金電極表面上,并利用其頂部序列與目標(biāo)miRNA結(jié)合。當(dāng)目標(biāo)miRNA存在時,該序列會被雙鏈特異性核酸酶(DSN)切割,觸發(fā)一系列反應(yīng),最終激活納米結(jié)構(gòu)的側(cè)鏈與P1進行SPAAC反應(yīng)。生成的長單鏈DNA自發(fā)折疊為莖環(huán)結(jié)構(gòu),縮短了P1末端修飾的二茂鐵與電極的距離,增強了電化學(xué)(http://www.weberwork.com/sell/l_9/)信號。
此檢測方法通過三維DNA納米結(jié)構(gòu)實現(xiàn)了對目標(biāo)miRNA序列的高效識別,并借助酶促反應(yīng)與SPAAC點擊化學(xué)反應(yīng)實現(xiàn)了電化學(xué)信號的放大,展現(xiàn)出高靈敏度、特異性和穩(wěn)定性。這種方法有望應(yīng)用于多種高風(fēng)險癌前病變的早期診斷模型中,為癌癥的早期檢測提供新工具(http://www.weberwork.com/sell/l_5/)。