復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院泌尿外科姜昊文教(http://www.weberwork.com/sell/l_31/)授團(tuán)隊(duì)在《Acta Pharmaceutica Sinica B》期刊上發(fā)表了一篇題為“IcarIT(http://www.weberwork.com/sell/l_25/)in inhibits the progression of urothelial cancer by suppressing PADI2-mediated neutrophil infiltration and neutrophil extracellular trap formation”的研究論文。研究揭示了淫羊藿苷（ICT）通過(guò)抑制PADI2介導(dǎo)的組蛋白瓜氨酸化和中性粒細(xì)胞中ROS的產(chǎn)生，減少NETs形成和中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，從而抑制尿路上皮癌（UCa）轉(zhuǎn)移的新機(jī)制。
研究發(fā)現(xiàn)
**體外實(shí)驗(yàn)**
ICT在體外實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出顯著的抗腫瘤活性，能夠有效抑制尿路上皮癌細(xì)胞（UMUC-3、T24、MB49）的生長(zhǎng)和增殖，并促進(jìn)細(xì)胞凋亡。IC50值分別為15.71、19.55和9.32 μmol/L，顯示了對(duì)癌細(xì)胞的強(qiáng)大抑制作用。ICT對(duì)細(xì)胞周期的調(diào)控有所不同：在T24細(xì)胞中主要表現(xiàn)為S期停滯，而在UMUC-3和MB49細(xì)胞中則為G2/M期停滯。盡管ICT對(duì)細(xì)胞侵襲能力的抑制效果有限，但其潛在的抗腫瘤活性值得進(jìn)一步研究。
**體內(nèi)實(shí)驗(yàn)**
在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，ICT通過(guò)口服給藥顯著抑制了C57BL/6J小鼠皮下和原位腫瘤模型的腫瘤生長(zhǎng)。30 mg/kg劑量的ICT增強(qiáng)了細(xì)胞毒性T細(xì)胞（CTLs）和M1型巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)，同時(shí)降低了免疫檢查點(diǎn)分子（如PD-1和CTLA-4）及M2型巨噬細(xì)胞的水平，并促進(jìn)了抗腫瘤效應(yīng)分子（如IFN-γ、Granzyme B）的分泌。此外，ICT還顯著抑制了中性粒細(xì)胞的浸潤(rùn)，提示其可能具有免疫調(diào)節(jié)作用。
**NET抑制**
ICT對(duì)NET形成具有抑制作用，與ICT處理組小鼠的皮下腫瘤比較，NET標(biāo)志物（如瓜氨酸化組蛋白H3和髓過(guò)氧化物酶）的表達(dá)顯著降低。體外共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)顯示，PMA誘導(dǎo)的NET形成增強(qiáng)了腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移，而ICT有效逆轉(zhuǎn)了這種效果。NET降解劑DNase I與ICT聯(lián)用具有協(xié)同效應(yīng)，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確認(rèn)了ICT對(duì)NET形成的抑制作用。
**EMT調(diào)控**
ICT在上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）中也發(fā)揮了調(diào)控作用。盡管ICT對(duì)EMT的抑制作用較溫和，但當(dāng)與NET降解劑聯(lián)用時(shí)，EMT的抑制作用明顯增強(qiáng)。ICT可以抑制N-cadherin的表達(dá)并增強(qiáng)E-cadherin的表達(dá)。此外，ICT還抑制了干性相關(guān)基因（如CD44、SOX2和OCT4）的表達(dá)，進(jìn)一步驗(yàn)證了其對(duì)腫瘤干性的抑制作用。
**機(jī)制研究**
機(jī)制研究表明，ICT通過(guò)抑制PADI2的表達(dá)，減少腫瘤細(xì)胞內(nèi)組蛋白瓜氨酸化，從而降低IL-6的轉(zhuǎn)錄，阻礙中性粒細(xì)胞的募集，進(jìn)一步抑制JAK2/STAT3信號(hào)通路。ICT還抑制了PADI2介導(dǎo)的自殺性NETosis和NET形成，揭示了其抗癌機(jī)制的新視角。
**預(yù)后標(biāo)志物**
研究還發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞標(biāo)志物CD66b與尿路上皮癌的不良預(yù)后、腫瘤分級(jí)和病理階段相關(guān)。雖然H3CIT單獨(dú)作為預(yù)后指標(biāo)效果有限，但CD66b與H3CIT的聯(lián)合分析能夠更好地預(yù)測(cè)腫瘤預(yù)后。術(shù)后血清中MPO-DNA水平升高的患者更易復(fù)發(fā)，提示中性粒細(xì)胞和NET相關(guān)成分可作為尿路上皮癌復(fù)發(fā)和進(jìn)展的潛在預(yù)測(cè)標(biāo)志物。
**免疫治療協(xié)同效應(yīng)**
ICT與抗PD-1免疫治療的聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同效應(yīng)，這種聯(lián)合策略在提升UCa患者治療效果方面具有極大的潛力。
總之，本研究不僅揭示了ICT通過(guò)抑制NETs形成和中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)來(lái)抑制尿路上皮癌轉(zhuǎn)移的新機(jī)制，還為ICT作為潛在的UCa治療方法提供了科學(xué)依據(jù)，并為未來(lái)的臨床應(yīng)用提供了新的思路。
